Skip to content

Aspekty immunopatopatologiczne nowej choroby zakaźnej noworodków wywołanej przez superantygen bakteryjny ad

1 miesiąc ago

735 words

W badaniu wzięło udział czterech pacjentów z NTED, dziesięciu bezobjawowych noworodkowych nosicieli MRSA i ośmiu noworodków bez MRSA. Pacjenci NTED zostali przyjęci do noworodkowego oddziału opieki medycznej w Szpitalu Uniwersyteckim w Tokio lub Miejskiego Centrum Medycznego Kawaguchi i zostali zdiagnozowani na podstawie kryteriów klinicznych ustalonych przez nas dla NTED, rumienia plus co najmniej jeden z następujących trzech objawy: małopłytkowość, niski poziom dodatniej CRP i gorączka (1, 2, 13). Wymazy z nosa, jamy ustnej i gardła oraz stolce, pobrane od noworodków w dniu 3 po urodzeniu, badano pod kątem obecności MRSA w celu wybrania bezobjawowych nosicieli MRSA i noworodków bez MRSA. Po uzyskaniu świadomej zgody rodziców pobierano próbki krwi obwodowej od pacjentów z NTED w fazie ostrej iw fazie zdrowienia oraz od bezobjawowych nosicieli MRSA i noworodków bez MRSA w dniu 5 po urodzeniu. Odczynniki i mAb. Sprzężony z FITC MPB2D5 (anty-Vp2), CH92 (anty-Vs3), SFCI12T4D11 (anty-CD4), fikoerytryna-cyjanina 5,1 (skoniugowany (sprzężony z PC5) UCHT1 (anty-CD3), 13B8.2 ( anty-CD4) i B9.11 (anty-CD8) zakupiono od Coulter Corp. (Hialeah, Floryda, USA). Sprzężone z fikoerytryną (sprzężone z PE) UCHL1 (anty-CD45RO) i SK1 (anty-CD8) zakupiono z Becton Dickinson Immunocytometry Systems (Mountain View, Kalifornia, USA). TSST-1 i enterotoksynę Staphylococcus A (SEA) zakupiono od Toxin Technology (Sarasota, Floryda, USA). Wykorzystane pożywki hodowlane RPMI-1640 zawierały 10% FCS i 5 x 10 5 M 2-ME. Rekombinowana IL-2 stosowana w teście IL-2 była dostarczona przez Takeda Chemical Industries (Kyoto, Japonia). Charakterystyka immunologicznych fenotypów komórek T za pomocą cytometrii przepływowej. PBMC izolowano przez odwirowanie z gradientem gęstości Ficoll-Conray, jak opisano wcześniej (20, 21). W celu zbadania odsetka limfocytów T V. 2+ (reaktywnych względem TSST-1) lub limfocytów T V. 3+ (reaktywnych z enterotoksyną gronkowcową B, SEB) (7, 8), PBMC wybarwiono kilkoma kombinacjami odpowiednich białek PC5- Skoniugowane z FITC lub PE mAb i badano za pomocą analizy cytometrii przepływowej trójkolorowej przy użyciu cytometru przepływowego EPICS XL (Coulter Corp.), jak opisano wcześniej (20, 21). Test indukowanej superantygenem produkcji IL-2 przez komórki jednojądrzaste. Izolowane PBMC (2 x 105) stymulowano 10 ng TSST-1 lub SEA na mililitr w objętościach 200 ul w okrągłodennych 96-studzienkowych płytkach do hodowli (Becton Dickinson, Franklin Lakes, New Jersey, USA) przez różne okresy czasu. . Aktywność IL-2 w supernatantach hodowli określono za pomocą komórek zależnych od IL-2 (3 CTLL-2, jak podano wcześniej (20, 21). Dane przedstawiono jako jednostki IL-2 na mililitr. Pomiar przeciwciał anty-TSST-1 za pomocą ELISA. Miana przeciwciał anty TSST-1 (IgG i IgM) mierzono testem ELISA, jak opisano wcześniej (22). W skrócie, surowicę rozcieńczoną do 1: 1000 i 1: 100 do miareczkowania przeciwciał IgG i IgM anty-TSST-1, odpowiednio, naniesiono na płytki wstępnie powleczone TSST-1 (3 lub niepowlekane, w dwóch powtórzeniach. Do płytek dodano sprzężone z peroksydazą królicze przeciwciała przeciwko ludzkiej IgG lub IgM (Organo Teknika Corp., West Chester, Pennsylvania, USA) i tetrametylobenzydynę (Sigma Chemical Co., St. Louis, Missouri, USA), i miana Ab określono na podstawie OD przy 450 nm. Dane są wyświetlane jako OD. Analiza statystyczna. Analizę statystyczną przeprowadzono za pomocą testu U Manna-Whitneya. Wartości P mniejsze niż 0,05 uznano za znaczące. Wyniki Profile kliniczne i dane laboratoryjne pacjentów z NTED, bezobjawowych nosicieli MRSA oraz noworodków bez MRSA. Profile kliniczne czterech pacjentów z NTED, dziesięciu bezobjawowych nosicieli MRSA i ośmiu badanych noworodków bez MRSA przedstawiono w Tabeli 1. Pacjent NTED P2 został przyjęty na oddział intensywnej opieki wkrótce po urodzeniu z powodu bycia wcześniakiem. Inni pacjenci NTED P1, P3 i P4 zostali przeniesieni z nowonarodzonego przedszkola na oddział intensywnej terapii po wystąpieniu NTED. U noworodków, P1, P3 i P4, konsekwentnie obserwowano obrzęk ogólnoustrojowy, gorączkę, niskie wartości dodatnie CRP w surowicy i trombocytopenię. Nie obserwowano gorączki u noworodka przedwcześnie urodzonego, P2, który wykazywał ataki bezdechu i nietolerancji pokarmu i miał objawowy przewód tętniczy. Podczas gdy wszyscy trzej noworodkowie z NTN powracali spontanicznie bez żadnej antybiotykoterapii, u wcześniaka, P2, wyzdrowiała po leczeniu wankomycyną. W dniu 2. 3 po wystąpieniu wykwity, liczba białych krwinek (WBC) i liczba limfocytów wszystkich czterech pacjentów z NTED była wysoka, a liczba płytek krwi była niska. Z wyjątkiem niewielkiego zwiększenia liczby krwinek białych w jednym nośniku MRSA, Ca1, dane laboratoryjne w dziesięciu bezobjawowych noworodkowych nosicielach MRSA były prawie takie same jak u noworodków bez MRSA
[więcej w: strażak pielgrzymowice, wisła strumień, przedszkole strumień ]
[przypisy: przedszkole strumień, olza pogwizdów, aparat ortodontyczny nfz ]