Skip to content

Główna rola VCAM-1, ale nie ICAM-1, we wczesnej miażdżycy

3 miesiące ago

587 words

VCAM-1 i ICAM-1 to śródbłonkowe cząsteczki adhezyjne z nadrodziny genu Ig, które mogą uczestniczyć w aterogenezie poprzez promowanie akumulacji monocytów w tętnicy wewnętrznej. Oba są wyrażane w regionach predysponowanych do miażdżycy i na obrzeżach ustalonych zmian, podczas gdy ICAM-1 jest również wyrażany szerzej. Aby ocenić funkcje VCAM-1 w przewlekłej chorobie, przerwaliśmy jej czwartą domenę Ig, wytwarzając mysi allel Vcam1D4D. MRNA i białko VCAM-1D4D zostały zredukowane do 2. 8% poziomu allelu dzikiego (Vcam1 +), ale wystarczały do częściowego uratowania letalnego fenotypu zarodków VCAM-1. Null. Po przejściu na tło receptora LDL, zerowe tło, pokrewne Vcam1 + / + i Vcam1D4D / D4D z miotami były generowane z heterozygotycznych krzyżówek i karmione dietą wzbogaconą w cholesterol przez 8 tygodni. Obszar wczesnych zmian miażdżycowych w aorcie, oznaczany ilościowo przez barwienie O, olejkiem plamistym en face, został znacząco zredukowany u myszy Vcam1D4D / D4D, chociaż poziomy cholesterolu, profile lipoprotein i liczby krążących leukocytów były porównywalne z typem dzikim. W przeciwieństwie do tego, niedobór ICAM-1 sam lub w połączeniu z niedoborem VCAM-1 nie zmienia powstawania zmian powstających. Dlatego, chociaż ekspresja zarówno VCAM-1, jak i ICAM-1 jest podwyższona w zmianach miażdżycowych, nasze dane wskazują, że VCAM-1 odgrywa dominującą rolę w inicjacji miażdżycy. Wprowadzenie Tworzenie zmian miażdżycowych polega na rekrutacji monocytów krwi do tętnicy tętniczej, wchłonięciu lipidów i przekształceniu w komórki piankowate makrofagów (1). Komórki śródbłonka są aktywowane w tym procesie (2) i eksprymują cząsteczki adhezyjne leukocytów i chemokiny, które przyczyniają się do miażdżycy tętnic (3. 9), po części regulując różne etapy procesu rekrutacji monocytów. Seleiny pośredniczą w początkowych interakcjach klejowych leukocytów. Chemokiny następnie stymulują leukocyty i zwiększają ekspresję integryny a4 i integryny y2 odpowiednio z VCAM-1 i ICAM-1, które same pośredniczą w dalszych etapach (10). VCAM-1 i ICAM-1 są ściśle związane ze strukturą i funkcją. Oba są nadrodzajowymi członami genu indukowalnego cytokiną, które wiążą integryny leukocytów (10). U normalnych myszy i królików zarówno VCAM-1, jak i ICAM-1 są wyrażane przez śródbłonek aorty w regionach predysponowanych do miażdżycy (11, 12). U zwierząt z hipercholesterolemią oba mają zwiększoną ekspresję we wczesnych uszkodzeniach komórek piankowatych, szczególnie na obrzeżach (11), gdzie przyczepność monocytów jest maksymalna (13). Jednak VCAM-1 jest unikalny pod tym względem, że jego ekspresja jest w znacznym stopniu ograniczona do zmian i regionów z predyspozycjami zmian chorobowych, podczas gdy ekspresja ICAM-1 rozciąga się na obszary niezaangażowanej aorty i obszary chronione przed uszkodzeniem (11). Ta różnica w wzorach ekspresji sugeruje różne funkcje VCAM-1 i ICAM-1 w inicjacji uszkodzenia. Badania z zastosowaniem myszy z niedoborem ICAM-1 (3 (Icam1 (3 / a) skrzyżowanych z tłem apoE-null (Apoe A / A) wykazały rolę dla ICAM-1 w opracowaniu. zmiany miażdżycowe (5, 14). Jednak analiza funkcji VCAM-1 u dorosłych nie była możliwa, ponieważ VCAM-1. a myszy z integryną a-4 umierają podczas embriogenezy (15-17). W tym badaniu wykorzystaliśmy strukturę genową VCAM-1 do wytworzenia homozygotycznych myszy z niedoborem VCAM-1 domeny 4 (D4D) (Vcam1D4D / D4D). Myszy Vcam1D4D / D4D wyrażają znacząco obniżone poziomy mRNA VCAM-1 i białka składające się z 6 domen Ig (6 Ig VCAM-1), częściowo omijają zarodkową letalność kompletnego niedoboru VCAM-1 i umożliwiają bezpośrednie porównanie VCAM-1 i VCAM-1. ICAM-1 w miażdżycy. Obecnie przedstawiamy zróżnicowany wymóg dla tych dwóch cząsteczek adhezyjnych nadrodziny Ig w tworzeniu wczesnych zmian miażdżycowych w całej aorcie myszy pozbawionych receptora LDL (Ldlr <3). Metody Zwierzęta. Myszy trzymano w grupach i karmiono standardową karmą w określonym środowisku wolnym od patogenów zgodnie ze wszystkimi instytucjonalnymi i rządowymi wytycznymi. Produkcja myszy VCAM-1 D4D. Aby wymienić 5. część eksonu 6 Vcam1 (kodująca domenę Ig 4) i sąsiadujący intron (Figura 1), konstrukt targetujący zawierał gen oporności na kinazę fosfogliceranową kinazy-1 / neomycynę (NEO) w przeciwnej orientacji transkrypcyjnej i 7,1 kb z 5. i 1,7 kb z 3. homologia. Mutantowy gen aktywatora wirusa polimorfiny / herpes simplex (TK) wirusa mutacji umożliwił selekcję przeciwko losowej integracji. Elektroporację i selekcję leku klonów komórek ES J1 przeprowadzono w sposób opisany uprzednio (15). Przenoszenie genów uzyskano za pomocą chimerycznych myszy otrzymanych z dwóch z sześciu docelowych linii komórek ES. Obie linie myszy miały nieodróżnialne fenotypy. Figura 1Homologiczna rekombinacja w locus genu Vcam1 [podobne: leczenie żylaków kończyn dolnych, pogotowie dentystyczne olsztyn, naturalne barwniki do jajek ] [więcej w: co oznacza sen o zdradzie, pełnia księżyca a samopoczucie, odklejenie siatkówki ]