Skip to content

Sygnalizacja ASK1 / 2 promuje zapalenie w mysim modelu neutrofilowej dermatozy ad

3 miesiące ago

11 words

Ablacja Ask1 i Ask2 u myszy Ptpn6spin znacząco (p <0,0001) ratuje skórną chorobę zapalną. Sygnalizacja ASK1 / 2 odgrywa kluczową rolę w regulacji choroby, w której pośredniczy Ptpn6spin, poprzez kontrolę NF-kB, ERK i p38 w dół od szlaków IL-1R i TLR, kontrolując w ten sposób wytwarzanie prozapalnych cytokin. Podsumowując, dane te pokazują, że oprócz dobrze znanej roli w apoptozie, kompleks sygnałowy ASK1 / 2 odgrywa główną rolę w regulacji zapalenia i choroby pośredniczonej przez Ptpn6spin. Wyniki i dyskusja Usunięcie sygnalizacji ASK poprawia stan zapalny skóry u myszy Ptpn6spin. Rola receptora IL-1. a sygnalizacja kierowana przez MyD88 została dobrze ugruntowana w wywoływaniu stanu zapalnego i zapalnej choroby skóry u myszy Ptpn6spin (3, 5). W kilku badaniach wykazano, że TAK1 jest niezbędnym centralnym regulatorem NF-kB, ERK i p38 w dół od aktywacji TLR (11, 12). Postawiliśmy hipotezę, że inne MAPK (ASK1 i ASK2) mogą również odgrywać kluczową rolę w pośredniczeniu w zapalnej chorobie skóry u myszy Ptpn6spin. Aby zidentyfikować nowych graczy uczestniczących w tym zapaleniu skóry, wygenerowaliśmy Ptpn6spinAsk1. / ., Ptpn6spinAsk2. / ., i Ptpn6spinAsk1. /. Ask2. /. myszy. Ptpn6spin / + (oznaczane jako Ptpn6 + / a dalej) myszy heterozygotyczne nie wykazywały żadnych oznak stanu zapalnego łapy i były używane jako kontrole. Zgodnie z wcześniejszymi ustaleniami (3, 7), myszy Ptpn6spin spontanicznie rozwinęły stan zapalny na stopce w okresie 6. 10 tygodni. Co ciekawe, Ptpn6spinAsk1. /. i Ptpn6spinAsk1. /. Ask2. /. myszy wykazywały znacznie opóźnione postępy choroby w porównaniu z myszami Ptpn6spin i około 60% Ptpn6spinAsk1. /. i Ptpn6spinAsk1. /. Ask2. /. myszy pozostawały wolne od choroby w końcowym punkcie eksperymentalnym wynoszącym 20 tygodni bez widocznych śladów opuchnięcia łapki (Figura 1A). Z drugiej strony, Ptpn6spinAsk2. /. myszy nie zapewniły żadnej istotnej ochrony przed chorobą (Figura 1A), co sugeruje, że delecja samego ASK1 jest wystarczająca do zapewnienia znaczącej ochrony u myszy Ptpn6spin. Jednak należy zauważyć, że postęp choroby był opóźniony w Ptpn6spinAsk2. /. myszy w porównaniu z myszami Ptpn6spin, co sugeruje częściową rolę ochronną dla ASK2. Analiza histologiczna potwierdziła, że myszy te wykazywały o wiele mniej stanów zapalnych i mniej uszkodzeń w porównaniu z myszami Ptpn6spin (Figura 1, B i C). Ponieważ zapalenie charakteryzuje się ciężką infiltracją neutrofili, przeanalizowaliśmy dalej sekcje łapy dla stóp za pomocą immunobarwienia charakterystycznego dla neutrofili. Barwienie wykazało ciężką neutrofilię u myszy Ptpn6spin, która została całkowicie uratowana w Ptpn6spinAsk1. /. Ask2. /. myszy (Figura 1, D i E). Te odkrycia ustalają ASK jako krytyczną kinazę wywołującą neutrofilowe zapalenie u myszy z Ptpn6spin. Ryc. 1Dokładanie sygnalizacji ASK poprawia skórną chorobę zapalną u myszy z Ptpn6spin. (A) Ptpn6 + /. (n = 16), Ptpn6spin (n = 25), Ptpn6spinAsk1. /. (n = 12), Ptpn6spinAsk2. /. (n = 9) i Ptpn6spinAsk1. /. Ask2. /. (n = 28) obserwowano krzyżowanie progresji choroby. (B) Obrazy footpad, (C) barwienie H & E, i (D) barwienie immunohistochemiczne neutrofili (Ly-6G) Ptpn6 + / p, Ptpn6spin i Ptpn6spinAsk1. /. Ask2. /. myszy (oryginalne powiększenie, × 20). (E) Kwantyfikacja odsetka całkowitego obszaru z infiltrującymi komórkami Ly-6G + pokazanymi w D. Krzywe choroby w A analizowano za pomocą testu log-rank Mantela-Coxa. (E) Do określenia istotności między dwiema analizowanymi grupami zastosowano dwuczynnikową ANOVA. NS, nieistotne. **** P <0,0001. Delecja ASK1 i ASK2 osłabia masową infiltrację komórek mieloidalnych u myszy Ptpn6spin. Naciek neutrofilowy i obrzęk łapy często charakteryzują się powiększeniem węzłów chłonnych podkolanowych, które drenują stan zapalny stóp. Przebadaliśmy Ptpn6 + / ., Ptpn6spin i Ptpn6spinAsk1. /. Ask2. /. myszy, aby potwierdzić obecność takich nieprawidłowości. Zgodnie z wcześniejszymi doniesieniami (3, 5), myszy Ptpn6spin wykazały splenomegalię oprócz powiększenia limfatycznego w podkolanowych węzłach chłonnych, które drenują stan zapalny stóp (Figura 2, A i B). Powiększone śledziony i podkolanowe węzły chłonne obserwowane u myszy Ptpn6spin zostały całkowicie odwrócone w Ptpn6spinAsk1. /. Ask2. /. myszy. W związku z ratowaniem śledzionowej i podkolanowej wielkości węzłów chłonnych, liczba komórek w śledzionie i podkolanowych węzłach chłonnych Ptpn6spinAsk1. /. Ask2. /. myszy były znacznie niższe niż liczba komórek w myszach Ptpn6spin (Figura 2, C i D). Analiza metodą cytometrii przepływowej wykazała ponadto, że odsetki neutrofili Grl + CDllb + w śledzionie i podkolanowych węzłach chłonnych Ptpn6spinAsk1. /. Ask2. /. zmutowane myszy wydają się być porównywalne do tych w Ptpn6 + /. myszy heterozygotyczne i są znacząco niższe niż u myszy z Ptpn6spin (Figura 2, E i F), co wskazuje, że zwiększona liczba naciekających i krążących komórek mieloidalnych jest odpowiedzialna za wywoływanie ropnego zapalenia w łapach myszy Ptpn6spin. Ryc. 2 Tłumienie delecji ASK2ASK1 [hasła pokrewne: lks beskid brenna, obliczanie wskaźnika bmi, strażak pielgrzymowice ] [przypisy: leczenie żylaków kończyn dolnych, strażak pielgrzymowice, lks strażak pielgrzymowice ]